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哥伦布的墓穴也在这个教堂里。哥伦布的灵柩石棺上有西班牙四古国——卡斯蒂尔、莱昂、纳瓦拉、阿拉贡的骑士雕像，仿佛正在抬起哥伦布的灵柩。
整个教堂是艺术的宝库。大教堂里的宗教画很多都是大师手笔，如圣安东尼奥礼拜堂的《圣安东尼奥的礼拜》，圣佩德罗礼拜堂的《圣告图》等。更多的艺术珍宝收藏在大教堂博物馆中，包括绘画、圣经古抄本、神父礼服和金银器等。
大教堂由五座哥特式殿堂组成，其中以主礼拜堂为甚。主礼拜堂由椭圆形的穹顶覆盖，内部是火焰状的翼部拱顶，形成高大的内部空间。墙上挂着穆里略画的各种著名宗教油画。除了主礼拜堂外，还有王室座堂、大教堂博物馆等，殿堂之间以交叉的宽广的回廊相连。
主礼拜堂是宗教活动的主要场所，装饰极为华丽，哥特式德祭坛荟萃了大量神态各异，栩栩如生的人物艺术雕像或绘画，具有很高的鉴赏价值。巨型祭坛浮雕描绘着基督生平的36个场景，装饰极为华丽。礼拜堂栅栏为雕刻繁复的银匠式风格，以精美的花叶形作为装饰。主礼拜堂的窗子是文艺复兴风格的铁格窗。唱诗班的座席是穆德哈尔风格，而管风琴则为巴洛克风格。
王室座堂是西班牙文艺复兴时期的早期作品，建筑物简洁的几何造型结构及其拱形圆顶的表面都布满了富丽堂皇的复杂纹样装饰。在祭坛正中安放了一座代表塞维利亚地方保护神国王圣母的木刻雕像。雕像前有三个王室成员的骨灰盒。中间一个华贵的银制骨灰盒是费尔南多三世（1217—1252年在位）国王的遗骨，两旁两个分别是皇后和儿子阿方索十世(1252～1284年在位)的骨灰盒。罗雷亚斯女神礼拜堂，则充满浓厚的哥伦比佩色彩，堂中有雕塑家克里斯多福·哥伦比亚的肖像，庄严的唱诗台，以及华丽的巴洛克式管风琴。